因業(yè)務(wù)調(diào)整，部分個(gè)人測(cè)試暫不接受委托，望見諒。

化妝品中丁基羥基茴香醚（BHA）和二丁基羥基甲苯（BHT）的高效液相色譜法檢測(cè)

簡(jiǎn)介

丁基羥基茴香醚（Butylated Hydroxyanisole，BHA）和二丁基羥基甲苯（Butylated Hydroxytoluene，BHT）是化妝品中常用的合成抗氧化劑，主要用于防止油脂氧化、延長(zhǎng)產(chǎn)品保質(zhì)期。然而，過量使用可能引發(fā)皮膚刺激、光敏反應(yīng)或內(nèi)分泌干擾效應(yīng)。世界衛(wèi)生組織（WHO）和各國(guó)監(jiān)管部門對(duì)化妝品中BHA、BHT的添加量設(shè)定了嚴(yán)格限制，如歐盟規(guī)定兩者單獨(dú)或混合使用時(shí)濃度不得超過0.1%（以脂肪含量計(jì)）。因此，建立準(zhǔn)確、靈敏的檢測(cè)方法對(duì)保障化妝品安全至關(guān)重要。高效液相色譜法（HPLC）因其分離效率高、靈敏度好、適用范圍廣等特點(diǎn)，成為BHA和BHT檢測(cè)的主流技術(shù)。

適用范圍

本檢測(cè)方法適用于各類化妝品基質(zhì)中BHA和BHT的定量分析，包括但不限于：

1. 油性基質(zhì)：乳液、面霜、卸妝油等含油脂成分的產(chǎn)品。
2. 水性基質(zhì)：化妝水、精華液等含水量較高的產(chǎn)品。
3. 固態(tài)或半固態(tài)產(chǎn)品：口紅、粉底、眼影等需通過溶劑提取的形態(tài)。 檢測(cè)濃度范圍通常為0.001%~0.5%（w/w），能夠滿足法規(guī)對(duì)低限和高限的要求。對(duì)于復(fù)雜基質(zhì)（如含色素或香精的產(chǎn)品），需通過前處理技術(shù)降低干擾。

檢測(cè)項(xiàng)目及簡(jiǎn)介

1. BHA（丁基羥基茴香醚） 化學(xué)名為3-叔丁基-4-羥基茴香醚，分子式C??H??O?。其通過釋放氫原子阻斷自由基鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，延緩油脂氧化，但長(zhǎng)期高濃度接觸可能增加致癌風(fēng)險(xiǎn)。
2. BHT（二丁基羥基甲苯） 化學(xué)名為2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚，分子式C??H??O。其抗氧化機(jī)制與BHA類似，但穩(wěn)定性更高，常用于高溫加工產(chǎn)品。研究表明，BHT可能對(duì)肝臟代謝產(chǎn)生潛在影響。

由于BHA和BHT常復(fù)配使用，且理化性質(zhì)相似（均為脂溶性酚類化合物），需通過色譜分離實(shí)現(xiàn)準(zhǔn)確定量。

檢測(cè)參考標(biāo)準(zhǔn)

1. GB/T 24800-2021 《化妝品中BHA、BHT的測(cè)定 高效液相色譜法》 該標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了化妝品中BHA和BHT的提取方法、色譜條件及結(jié)果計(jì)算，適用于常規(guī)檢測(cè)。
2. ISO 17226:2018 《化妝品-抗氧化劑BHT和BHA的測(cè)定-HPLC法》 國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化組織發(fā)布的方法，強(qiáng)調(diào)方法驗(yàn)證參數(shù)（如線性范圍、回收率）。
3. USP <621> 《色譜法通則》 美國(guó)藥典對(duì)HPLC系統(tǒng)適用性、色譜柱選擇等提出技術(shù)指導(dǎo)。

檢測(cè)方法及儀器

1. 樣品前處理

• 提取：稱取0.5 g樣品，加入10 mL甲醇-正己烷（1:1, v/v）混合溶劑，超聲提取30分鐘，離心后取上層清液。
• 凈化：若基質(zhì)復(fù)雜，可采用C18固相萃取柱凈化，甲醇洗脫目標(biāo)物。

2. 色譜條件

• 色譜柱：C18反相色譜柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）。
• 流動(dòng)相：甲醇-水（85:15，v/v），等度洗脫。
• 流速：1.0 mL/min。
• 檢測(cè)波長(zhǎng)：280 nm（BHA）和277 nm（BHT）。
• 柱溫：30℃。
• 進(jìn)樣量：20 μL。

3. 儀器設(shè)備

• 高效液相色譜儀：配備紫外檢測(cè)器（UV）或二極管陣列檢測(cè)器（DAD），如Agilent 1260系列、Waters Alliance e2695。
• 輔助設(shè)備：超聲波清洗器、高速離心機(jī)（≥10,000 rpm）、分析天平（精度0.0001 g）。

4. 定量分析 采用外標(biāo)法繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線（濃度范圍0.1~50 μg/mL），計(jì)算樣品中BHA和BHT的含量。方法驗(yàn)證需滿足以下要求：

• 線性：相關(guān)系數(shù)R²≥0.999。
• 回收率：80%~110%。
• 精密度：相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）≤5%。

總結(jié)

高效液相色譜法通過優(yōu)化提取溶劑、色譜條件及凈化步驟，能夠有效分離并定量化妝品中的BHA和BHT，適用于不同基質(zhì)產(chǎn)品的質(zhì)量控制。未來，隨著檢測(cè)需求的提升，聯(lián)用技術(shù)（如HPLC-MS）或自動(dòng)化前處理設(shè)備將進(jìn)一步增強(qiáng)方法的準(zhǔn)確性和效率?；瘖y品企業(yè)應(yīng)結(jié)合法規(guī)要求，建立完善的檢測(cè)體系，確保產(chǎn)品安全合規(guī)。